簡(jiǎn)要描述:
丙二醛(MDA)測(cè)試盒作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過(guò)氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
更新時(shí)間:2024-09-03;廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商;覽量:1632
商品詳情:
丙二醛(MDA)測(cè)試盒測(cè)定意義:
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過(guò)氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3263 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3263-1 | 50管/48樣 | 可見(jiàn)分光光度法 |
測(cè)定原理:
MDA與硫代巴比酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有最大吸收峰,進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過(guò)氧化脂質(zhì)的含量;同時(shí)測(cè)定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計(jì)算MDA的含量。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體ELISA試劑盒 HIT免費(fèi)代測(cè)試劑
抗肝可溶性抗原抗體ELISA試劑盒 SLA免費(fèi)代測(cè)試劑
抗甘氨酰tRNA合成酶ELISA試劑盒 GARS免費(fèi)代測(cè)試劑
抗鈣調(diào)素特異抗體ELISA試劑盒 CAM-ab免費(fèi)代測(cè)試劑
抗鈣抑素抗體ELISA試劑盒 ACAST-DⅣ免費(fèi)代測(cè)試劑
抗副流感病毒IgM抗體ELISA試劑盒 anti-PIV IgM免費(fèi)代測(cè)試劑
抗副流感病毒IgG抗體ELISA試劑盒 anti-PIV IgG免費(fèi)代測(cè)試劑
抗父體淋巴細(xì)胞毒性抗體ELISA試劑盒 APCA免費(fèi)代測(cè)試劑
抗風(fēng)疹病毒IgM抗體ELISA試劑盒 anti-RV IgM免費(fèi)代測(cè)試劑
抗風(fēng)疹病毒IgG抗體ELISA試劑盒 anti-RV IgG免費(fèi)代測(cè)試劑
抗肺泡基底膜抗體ELISA試劑盒 ABM-Ab免費(fèi)代測(cè)試劑
抗紡錘體抗體ELISA試劑盒 MSA免費(fèi)代測(cè)試劑
抗二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5ELISA試劑盒 DPYSL5/CRMP5免費(fèi)代測(cè)試劑
抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體ELISA試劑盒 PM-Scl/PM-1免費(fèi)代測(cè)試劑
抗丁型肝炎病毒抗體ELISA試劑盒 anti-HDV免費(fèi)代測(cè)試劑
丙二醛(MDA)測(cè)試盒內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測(cè)試盒100管/48樣 微量法
內(nèi)切β1,4葡聚糖酶(Cx)測(cè)試盒50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
外切β1,4葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1)測(cè)試盒100管/48樣 微量法
外切β1,4葡聚糖酶/纖維二糖水解酶(C1)測(cè)試盒50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
NADPH還原酶(NCR)測(cè)試盒100管/96樣 微量法
NADPH還原酶(NCR)測(cè)試盒50管/48樣 可見(jiàn)分光光度法
N去甲基化酶(AND)測(cè)試盒100管/48樣 微量法
N去甲基化酶(AND)測(cè)試盒50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法
苯胺4羥化酶(AH)測(cè)試盒100管/48樣 微量法