簡要描述:
可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中,催化淀粉鏈延長,主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1060
商品屬性:
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3344-1 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3344 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
YSH3344 | 25管/24樣 | 紫外分光光度法 |
商品詳情:
可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒測定意義
SSS(EC 2.4.1.21)通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中,催化淀粉鏈延長,主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。
測定原理
SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP,在反應(yīng)體系中添加的酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比,340nm下測定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,4℃避光保存。
測定操作:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。
4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測定一次。
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